Морфологический метод определения фетального гемоглобина по Клейхауэру и Ветке
Фетальный гемоглобин (эритроциты с фетальным гемоглобином) определяют в целях контроля за полнотой заменного переливания крови у новорожденных, как дополнительный диагностический тест при угрожающем и начавшемся выкидыше, при ретроплацентарной гематоме, а также при попадании крови плода в кровяное русло матери. Для постановки метода требуется 1 капля периферической крови, из которой делают мазок. Не позднее чем через 1 ч после взятия крови его необходимо фиксировать. После этого мазок подвергают обработке лимонно-кислофосфатной буферной смесью (рН 3,2).
Окраска мазка. Мазок опускают на 3 мин в гематоксилин (способ Эрлиха), промывают, высушивают, окрашивают 0,1% водным раствором эритрозина (способ Мерка) 3 мин и вновь промывают и высушивают. При необходимости зафиксированные и высушенные мазки можно сохранять в холодильнике в течение 4-5 дней, но перед погружением в буферную смесь их следует довести до комнатной температуры. Обработка свежих мазков позволяет получить более четкую картину. Удаление пузырьков воздуха из смеси перед погружением мазков достигается подогреванием ее до 70-80°. Эритроциты с фетальным гемоглобином окрашиваются в ярко-розовый цвет. Эритроциты с гемоглобином взрослого человека видны в виде теней. В мазке сосчитывают число эритроцитов с фетальным гемоглобином на 1000 эритроцитов-теней. При трактовке полученных результатов необходимо иметь исходные данные или показатели динамического наблюдения, так как в крови здоровых людей содержится до 2% фетального гемоглобина.