Определение уробилина в моче
При определении уробилина в моче выполняют следующие указания:
- При наличии в моче большого количества белка его удаляют.
- Определение производят в профильтрованной моче.
- При наличии в моче билирубина его удаляют, так как билирубин препятствует определению уробилина. К моче прибавляют 1-2 капли настойки йода, которая окисляет уробилиногеп в уробилин. Затем к 8 мл мочи прибавляют 2 мл 10% раствора хлористого кальция или хлористого бария и несколько капель аммиака до получения щелочной реакции и отфильтровывают мочу. Определение уробилина производят в фильтрате.
При наличии большого количества уробилина моча имеет оранжевый цвет. Уробилин в моче определяют:
- реакцией Богомолова;
- реакцией Флоранса.
Определения уробилина (реакция Богомолова, Флоранса) основаны на ускорении окисления уробилиногена путем прибавления окислителя.
Реакция Богомолова
Чтобы поставить реакцию Богомолова, необходим насыщенный раствор сернокислой меди, который готовят по следующей прописи: 50 г химически чистой сернокислой меди растворяют в 70-80 мл дистиллированной воды и доводят объем раствора до 100 мл.
Постановка реакции. 10 мл профильтрованной, освобожденной от белка мочи, взятой из суточного ее количества, помещают в пробирку. К моче прибавляют 3 мл насыщенного водного раствора сернокислой меди и при наличии мути еще несколько капель концентрированной соляной кислоты до просветления раствора. Через 5 минут прибавляют 3 мл хлороформа и осторожно смешивают содержимое пробирки. Результат учитывают в течение одного часа.
При наличии уробилина хлороформ (в нижней части пробирки) окрашивается в розово-красный или медно-красный цвет. Интенсивность окраски зависит от количества уробилина.
Реакция Флоранса
10 мл профильтрованной мочи помещают в пробирку, прибавляют 3 капли концентрированной серной кислоты, содержимое пробирки смешивают и приливают 3 мл эфира. Пробирку закрывают резиновой пробкой.
Содержимое пробирки осторожно смешивают, чтобы пе взболтать эфир, который плохо отслаивается.
В другую пробирку наливают 2 мл концентрированной соляной кислоты, на которую наслаивают эфирную вытяжку из первой пробирки.
При наличии уробилина на границе обеих жидкостей образуется красно-фиолетовое кольцо.