Осмотическая резистентность эритроцитов
Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:
- Штатив.
- Пробирки химические или серологические.
- Пипетки градуированные.
- Капилляр к гемометру Сали.
- Набор для укола в палец.
- 1% раствор поваренной соли.
- Дистиллированная вода.
Определение осмотической резистентности по Лимбеку и Рибьеру
Определение основано на различной сопротивляемости эритроцитов по отношению к гипотоническим раствором NaCl. При определении осмотической резистентности эритроцитов соблюдают следующие правила:
- Готовят точный 1% раствор поваренной соли и из него тщательно приготавливают гипотонические растворы NaCl.
- Разливают гипотонические растворы поваренной соли начиная с наибольшего ее разведения.
- Взятую кровь приливают в пробирки начиная с наименьшего разведения поваренной соли.
Для исследования необходимы следующие реактивы:
- 1% раствор поваренной соли: 10 г химически чистого NaCl помещают в 1 л мерную колбу и доливают дистиллированной водой до метки.
- Растворы хлористого натрия различной концентрации готовят из 1% раствора NaCl по схеме, приведенной на следующем рисунке.
Техника определения. В штатив устанавливают 26 пробирок, маркируют их соответственно концентрации гипотонических растворов NaCl.
Градуированной пипеткой берут по 1 ил каждого раствора и наливают в соответствующую пробирку (растворы разливают начиная с 0,2% концентрации NaCl). В каждую пробирку, начиная с 0,7% концентрации NaCl, вносят по 0.02 мл крови, взятой капилляром от гемометра. Содержимое пробирок смешивают и оставляют при комнатной температуре; результаты учитывают через 6 часов (лучше через сутки). Минимальную резистентность учитывают по разведению NaCl той пробирки, где под осадком из эритроцитов жидкость окрашена в слегка желтоватый цвет. Максимальную резистентность учитывают по разведению NaCl той пробирки, в которой эритроциты полностью гемолизированы (кровь в пробирке прозрачная и ярко-красная).
В норме минимальная резистентность эритроцитов колеблется в пределах 0,5-0,46, а максимальная — 0,32-0,3.