Приготовление нативных препаратов из осадков мочи для микроскопического исследования
Оснащение рабочего места
Для проведения данных исследований рабочее место должно быть оснащено следующими элементами:
- Пипетки цилиндрической формы.
- Центрифужные пробирки.
- Пипетки с оттянутым концом.
- Предметные и покровные стекла.
- Чашки Петри.
- Шпатель и зубоврачебная игла
- Электрическая или ручная центрифуга.
- Тетраборпокислый натрий гидрат.
- Борная кислота.
- Концентрированная соляная кислота.
Приготовление нативных препаратов из осадков мочи
Для приготовления нативных препаратов из осадков мочи необходимо выполнять следующие указания:
1. Производить собирание осадков мочи не раньше, чем через 1-2 часа после доставки ее в лабораторию и центрифугировать ее не менее 5-10 минут.
2. Оценивать видимые осадки в центрифужных пробирках по их цвету и характеру.
3. Приготовлять нативные препараты с помощью пипеток с оттянутым концом. Перед приготовлением препаратов центрифужную пробирку с мочой (после центрифугирования) быстрым движением наклоняют, сливают в пустую банку приблизительно третью часть мочи, находящейся над осадком, и тотчас же возвращают в вертикальное положение. Эту манипуляцию производят так, чтобы не взболтать осадок. Указательным пальцем правой руки закрывают верхнее отверстие пипетки с суженным концом. Вносят пипетку на дно центрифужной пробирки. Приоткрывают верхнее отверстие пипетки: осадок мочи с небольшим количеством жидкости набирается в пипетку. Моментально закрывают пальцем верхнее отверстие пипетки и извлекают ее из пробирки. Взятый осадок помещают на чистое предметное стекло и осторожно накрывают покровным стеклом. В правильно приготовленном препарате не должно быть пузырьков воздуха и избыток жидкости не должен выходить за пределы покровного стекла. Если осадок состоит из нескольких слоев, то вначале готовят препарат, как описано выше, а затем содержимое вновь центрифугируют и готовят препараты из каждого слоя в отдельности.
При отсутствии видимого на глаз осадка препарат готовят так же, как обычно.
При наличии значительного осадка из уратов, фосфатов или эритроцитов сначала готовят нативный препарат, а затем растворяют осадок, оставшийся в пробирке, и снова готовят препарат для микроскопического исследования. Приготовление двух препаратов необходимо потому, что значительный осадок из перечисленных выше компонентов препятствует обнаружению других элементов мочи.
Техника растворения уратов
Для pacтворения уратов рекомендуют использовать реактив Селена: 5 г буры и 5 г борной кислоты растворяют в 100 мл горячей дистиллированной воды. К оставшемуся после приготовления препарата осадку приливают реактив Селена в количестве, равном количеству мочи. Содержимое пробирки смешивают. При этом ураты растворяются. Ураты можно также растворить, добавив равное количество теплой водопроводной воды и подогреванием осадка мочи в приготовленном препарате. Недостаток последних двух способов состоит в том, что при охлаждении ураты вновь выпадают в осадок.
Техника растворения фосфатов
Фосфаты растворяют в 10% растворе соляной кислоты (10 г концентрированной соляной кислоты помещают в цилиндр и доливают до 100 мл дистиллированной водой). Техника растворения та же, что и уратов. При растворении фосфатов разрушаются форменные элементы осадка, поэтому необходимо один препарат приготовить до обработки 10% раствором соляной кислоты, а другой — после такой обработки.
Техника растворения эритроцитов
Осадок из эритроцитов растворяют с помощью дистиллированной воды таким же способом, как и солевые осадки. После растворения эритроцитов вновь производят центрифугирование, а затем готовят нативные препараты по описанной выше методике.
В некоторых случаях (рак мочевыводящих путей) нативные препараты готовят из клочков, сгустков и нитей, пользуясь способом послойного исследования мочи по Эрлиху.
Этот способ состоит в следующем. Вслед за проведением физико-химического исследования и приготовлением нативных препаратов мочу, оставшуюся в посуде, взбалтывают и просматривают с целью обнаружения в ней клочков, сгустков и нитей. При наличии таких элементов всю порцию мочи, каждый раз взбалтывая, разливают в несколько чашек Петри. Затем, располагая чашки на белом и черном фоне, с помощью шпателя и иглы вылавливают имеющиеся клочки, сгустки или нити и помещают на предметное стекло, их растягивают, а затем добавляют каплю мочи. Приготовленный препарат покрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом.
Если приготовленные нативные препараты необходимо сохранить на некоторое время, их переносят во влажную камеру (эксикатор, чашки Петри и пр.), где, помимо препаратов, помещают увлажненную вату. Во влажной камере препараты сохраняются в течение нескольких часов.
