Лабораторные исследования при дерматомикозах
Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:
- Скальпель (скарификатор).
- Эпиляционный пинцет.
- Шпатель и игла.
- Бумажные пакетики.
- Чашки Петри.
- Пробирки.
- Предметные и покровные стекла.
- Едкий калий или едкий натр.
- Спирт этиловый 96°.
- Дистиллированная вода.
- Микроскоп.
Взятие материала для исследования
Для исследования используют волосы, чешуйки, ногти, а иногда и гной. Инструментами для взятия материала служат эпиляционный пинцет, скальпель или скарификатор, анатомический пинцет и пр.
При взятии материала с волосистой части головы больного усаживают так, чтобы волосы были хорошо освещены. Внимательно осматривают всю поверхность головы, а в участке облысения подрывают чешуйки, которые захватывают пинцетом вместе с пораженным волосом. При этом пораженный волос не следует тянуть пинцетом, так как он может обломиться, в результате чего та часть его, которая расположена в коже, не будет подвергнута исследованию. При наличии нескольких мест поражения материал берут с каждого из них. Чтобы лучше рассмотреть и отобрать материал, можно воспользоваться лупой.
При поражении грибками гладкой кожи вместе с чешуйками берут и пушковые волосы; чешуйки и покрышки пузырьков соскабливают шпателем или скальпелем с периферических участков очагов поражения.
При исследовании ногтей с помощью острой бритвы или скальпеля производят соскабливание чешуек с поверхностных очагов поражения и срезают пластинки из более глубоких слоев пораженного ногтя.
Волосы, чешуйки (кожные и ногтевые), скутулы помещают в двойные пакетики из черной бумаги, на которых надписывают место и дату взятия материала, диагноз, фамилию, имя и отчество больного. Материал рекомендуется брать в достаточном количестве, чтобы можно было провести повторное исследование. Гной собирают стерильной пастеровской пипеткой, микробиологической петлей, стерильным шприцем в пробирки или колбочки с притертой пробкой.
Обработка полученного материала и приготовление препаратов
Полученный материал подвергают специальной обработке для того, чтобы растворить эпидермальные клетки, слизь и гной, а также для просветления пигмента волос. Это делает препарат более наглядным для исследования. Отобранные волосы и чешуйки помещают на предметное стекло и прибавляют каплю 30% раствора КОН. Препарат подогревают над пламенем горелки (не доводить до кипения!) до появления на периферии капли нежного белого ободка, состоящего из кристаллов едкого кали. Затем препарат покрывают покровным стеклом. Гной, мокроту, осадок мочи и пр. вносят в капельку 10% раствора NaOH, накрывают покровным стеклом и исследуют без подогревания.
В связи с тем что ногти труднее поддаются воздействию щелочи, их предварительно заливают на сутки 30% раствором КОН. С этой же целью используют метод обогащения по Черногубову в видоизменении Кашкина: срезы ногтей помещают на дно пробирки, прибавляют 1-2 капли 20% КОН и ставят в кипящую водяную баню на 20-60 минут до тех пор, пока не растворятся роговые пластинки. Содержимое пробирки переливают в центрифужную пробирку, центрифугируют 10-15 минут, быстро сливают верхнюю часть жидкости и из образующегося осадка готовят препарат. Препараты исследуют микроскопически сначала под малым, а затем под большим увеличением с суженной диафрагмой в течение первых двух часов после их приготовления. С целью обнаружения дрожжеподобных грибков, а также для установления начальных стадий поражения С. Л. Козин предлагает использовать метод фазовоконтрастной микроскопии.
