Химическое исследование испражнений
В данной статье будет рассмотрено определение кровяного пигмента в кале, желчного пигмента (реакция Шмидта) и реакция на белковую экссудацию в кале по Вишнякову-Трибуле.
Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:
- Пробирки.
- Пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл.
- Глазные пинетки.
- Штатив для пробирок.
- Предметные стекла.
- Чашки Петри.
- Фарфоровая ступка.
- Пирамидон.
- Пергидроль. Ледяная уксусная кислота.
- Хлорная ртуть HgCl2 (сулема).
- Трихлоруксусная кислота.
- Дистиллированная вода.
Определение кровяного пигмента в кале
Кровяной пигмент лучше всего определять с пирамидоном при обязательном соблюдении следующих условий:
- Больной за 3-5 дней до предстоящего анализа находится на диете, из которой исключены мясо, рыба, яйца весенней кладки, зеленые части овощей, лекарственные вещества, содержащие железо (гематоген), магний, висмут, карболен.
- Кал тщательно перемешивают лопаточкой и берут для исследования из разных мест.
- Используют химически чистые реактивы и посуду.
- Определение скрытой крови обычно производят в течение нескольких дней подряд.
Необходимые реактивы:
- 30% раствор уксусной кислоты: 30 мл ледяной уксусной кислоты помещают в колбочку на 100 мл и доливают водой до метки 100 мл.
- 5% раствор пирамидона в 96 градусном этиловом спирте.
- 3% раствор перекиси водорода.
Постановка реакции. В пробирке разводят кал с водой в соотношении 1 : 10. В другую химически чистую пробирку наливают 2 мл разведенного кала, 2 мл 5% спиртового раствора пирамидона, 10 капель 30% раствора уксусной кислоты и 8-10 капель 3% раствора перикиси водорода.
При наличии фиолетового окрашивания реакция положительная. Если в течение 3 минут окраска смеси не изменяется, значит реакция отрицательная.
Определение желчного пигмента (реакция Шмидта)
Для этой реакции применяют насыщенный водный раствор хлорной ртути (сулемы): 7 г HgCl2 растворяют при нагревании в 100 мл дистиллированной воды, охлаждают и фильтруют через бумажный фильтр.
Постановка реакции. Небольшой комочек кала тщательно растирают в фарфоровой ступке с насыщенным раствором хлорной ртути и переливают в чашку Петри. Смесь оставляют па несколько часов.
При отсутствии желчных пигментов окраски не наступает. При наличии стеркобилина появляется розовато-красное окрашивание, при наличии билирубина — зеленое.
Реакция на белковую экссудацию в кале по Вишнякову-Трибуле
Принцип метода основан на том, что при прибавлении к эмульсии кала реактивов, осаждающих белки и муцин, образующиеся хлопья адсорбируют микроорганизмы и детрит, взвешенные в каловой эмульсии. Хлопья оседают на дно и эмульсия просветляется.
Постановка реакции. Для реакции необходимы следующие реактивы:
- Насыщенный водный раствор сулемы.
- 20% раствор уксусной кислоты: 20 мл ледяной уксусной кислоты помещают в колбочку на 100 мл и доливают водой до метки 100 мл.
- 20% раствор трихлоруксусной кислоты: 20 г трихлоруксусной кислоты помещают в колбочку на 100 мл и доливают дистиллированной водой до метки 100 мл.
Готовят 3% эмульсию кала: 3 г исследуемого кала растирают в ступке со 100 мл дистиллированной воды. В заранее пронумерованные четыре химические пробирки наливают по 15 мл приготовленной эмульсии, в первую пробирку — 2 мл 20% раствора трихлоруксусной кислоты, во вторую — 2 мл насыщенного раствора сулемы, а в третью — 2 мл 20% раствора уксусной кислоты, в четвертую пробирку приливают 2 мл дистиллированной воды. Содержимое каждой из пробирок смешивают и оставляют на 24 часа. Через сутки устанавливают степень просветления жидкости над осадком и окраску осадка. При наличии мутности такой же, как и в контрольной (четвертой) пробирке, реакция отрицательная ( — ),если муть слабее, чем в контрольной пробирке, то реакция слабо положительная (+ +), при слабой мутности реакция положительная ( + + + ), при полном просветлении жидкости над осадком реакция резко положительная ( + + + + ). Если во второй пробирке (с сулемой) появится розовато-коричневое окрашивание, то это указывает на наличие стеркобилина, если зеленое — на присутствие билирубина, зеленое окрашивание в первой пробирке (с трихлор-уксусной кислотой) свидетельствует о наличии билирубина.