Исследование семенной жидкости
Оснащение рабочего места - такое же как и при исследовании влагалищного мазка.
Техника получения семенной жидкости для исследования
Семенную жидкость собирают в чистый сухой сосуд и срочно передают в лабораторию для исследования. Для того чтобы предотвратить влияние колебаний температуры на сперматозоиды, полученную для исследования сперму следует сохранять при комнатной температуре.
Лучше всего исследовать сперму через 30 минут после ее получения, так как к этому времени обычно наступает полное разжижение и гомогенизация семенной жидкости под влиянием фермента гиалуронидазы.
Семенную жидкость изучают макроскопически (изучение общих и физических свойств) и микроскопически.
Техника определения физических свойств семенной жидкости
Определяют количество исследуемой спермы, ее цвет, прозрачность, консистенцию, запах и реакцию. Количество спермы измеряют в градуированной пробирке по нижнему мениску семенной жидкости (у здоровых лиц количество спермы, выделяемое за эякуляцию, равно приблизительно 3-4 мл).
Консистенцию определяют с помощью стеклянной палочки с оплавленным концом. С этой целью конец палочки вносят в исследуемую сперму: при нормальной консистенции семенная жидкость свободно стекает с палочки в виде капель, а при повышенной вязкости тянется вслед за движением палочки.
Реакция спермы определяется с помощью универсальной лакмусовой бумажки.
Микроскопическое исследование семенной жидкости
Это исследование включает в себя изучение нативных препаратов, подсчет количества сперматозоидов в счетной камере Горяева и изучение микроскопических элементов в окрашенных препаратах.
Техника приготовления и изучения нативных препаратов из семенной жидкости
Исследуемую семенную жидкость выливают в небольшую чашечку и в ней размешивают сперму, после чего 1-2 капли жидкости с помощью пипетки наносят на чистое предметное стекло; материал накрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом (окуляр 7Х, объектив 40Х).
В нативных препаратах, приготовленных из нормальной семенной жидкости, видно большое количество подвижных сперматозоидов, имеющих грушевидную головку, шейку и хвостик.
Чтобы определить количество сперматозоидов на одно поле зрения микроскопа, их подсчитывают в двадцати-тридцати полях зрения и выводят среднее арифметическое.
Одновременно с этим учитывают количество сперматозоидов, сохранивших и утративших подвижность. Если в нативном препарате обнаружить сперматозоидов не удается, то часть семенной жидкости центрифугируют 10 минут при 3500 об/мин. Каплю осадка помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и вновь изучают препарат под микроскопом.
Помимо обычно приготовленного нативного препарата, исследуют отобранные из спермы на черном и белом фоне нити или клочки. С этой целью указанные образования с помощью шпателя и иглы извлекают из семенной жидкости, помещают па предметное стекло, добавляют каплю жидкости, накрывают покровным стеклом и изучают под малым и большим увеличением.
В нативных препаратах, помимо сперматозоидов, можно обнаружить лейкоциты, эритроциты, лецитиновые зерна, слоистые тельца простаты, яичковые цилиндры (описание дано в статье «Микроскопическое исследование мочи»).
Подсчет сперматозоидов в счетной камере Горяева
Для этого приготовляют разводящую жидкость следующим образом: в колбочку помещают 5 г двууглекислого натрия и приливают к нему 1 мл 40% нейтрального формалина и 100 мл дистиллированной воды.
Исследуемую семенную жидкость после предварительного размешивания набирают в смеситель для лейкоцитов до метки 0.5. Затем набирают разводящую жидкость до метки 11. Смешивают содержимое смесителя и укладывают его на стол.
К чистой и сухой поверхности камеры Горяева притирают шлифованное покровное стекло. Смеситель неоднократно встряхивают и счетную камеру заполняют так же, как для подсчета форменных элементов крови.
Через несколько минут камеру устанавливают на предметный столик микроскопа и производят подсчет сперматозоидов в 16 средних (256 малых) квадратах при увеличении окуляр 10Х (15Х), объектив 8Х, при опущенном конденсоре. Полученное число сперматозоидов умножают на 312 500 и получают их количество в 1 мл семенной жидкости.
В норме в 1 мл содержится от 100 до 150 млн. сперматозоидов.
Техника приготовления и изучения окрашенных по Романовскому препаратов семенной жидкости
Каплю тщательно размешанной семенной жидкости помещают на предметное стекло и распределяют так же, как мазок крови. Приготовленный препарат немедленно подсушивают на воздухе, фиксируют 3 минуты в фиксаторе Май-Грюнвальда, ополаскивают дистиллированной водой и окрашивают разведенной по титру краской Романовского в течение 20-30 минут.
Затем краску сливают и препарат осторожно промывают водой и высушивают. Окрашенный по Романовскому препарат изучают с иммерсионной системой микроскопа.
В таких препаратах окончательно устанавливают наличие или отсутствие сперматозоидов, а также определяют их различные морфологические формы. Кроме нормальных сперматозоидов, могут встречаться и дегенеративные (например, с двойной головкой, без шейки, с несколькими хвостами т. д.).
